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從儀器構成來說,普通PCR儀主要由熱循環系統組成,熒光定量PCR儀和數字PCR儀除了熱循環系統外,還含有光學檢測系統以及配套的操作分析軟件! 乜匦阅苁荘CR反應最重要的影響因素之一 由PCR原理也可看出,PCR反應是不斷升溫和降溫的過程。需要能在變性-退火-延伸這三個關鍵步驟進行溫度控制。溫度控制涉及溫度準確性、干式恒溫加熱器均一性、升降溫速率、溫度梯度等多個方面! 囟葴蚀_性是PCR儀的重要性能指標。如果儀器溫度準確性差,樣品槽的實際溫度不能達到設定溫度,那就無法獲得預期的擴增結果,即要么擴增不出來,要么產生非特異性擴增甚至是錯誤擴增! 囟染恍允谦@得穩定擴增的保障。若PCR儀的溫度均一性差,在出現不同擴增結果時就無法判斷是樣品本身不同造成還是儀器性能不好所導致! ∩禍厮俾什粌H直接影響PCR實驗用時,進而影響工作效率,還會影響擴增產物的特異性。升降溫速率越快,特異性越好! CR儀梯度溫度功能對于反應條件的優化(尤其是退火溫度的優化)有很大幫助。對于新開展的實驗,通過溫度梯度功能快速獲得最佳退火溫度! 悠凡鄄馁|影響溫控性能 PCR儀樣品槽的材質,會影響上述這幾個溫控方面性能,F在大多數PCR儀采用的是鋁合金材質樣品槽,高端PCR儀則采用熱導性能更好的銀質樣品槽! 」鈱W檢測系統對結果產生很大影響干式恒溫加熱器 對于熒光定量PCR儀來說,光學檢測系統的好壞對檢測結果會產生很大影響。光學檢測系統主要包含激發光源、檢測器、信號采集方式、檢測通道數量等方面! 〖ぐl光源需考慮光譜范圍和光強。雖然現在新一代產品的激發光源大多都是LED燈,但單色LED燈和復合光白色LED燈,在激發效果上還是各有優劣。最好能利用各自的優勢形成既寬又強的光照激發效果。